用Trizol法从组织中提取总RNA的具体方法
编辑：Simone
2025-04-27 12:08:37
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最近小编收到很多问题，其中一个就是下面小编为大家整理一下关于用Trizol法从组织中提取总RNA的具体方法的步骤，希望这些方法能够帮助到大家。
首先，将组织块直接放入研钵中，加入少量的液氮，迅速研磨，待组织变软，再加入少量的液氮，再研磨，重复三次。
然后，将组织样品按50-100mg加入1mlTrizol，转移入离心管。另外组织体积不能超过Trizol体积的10%，再用电动均浆器充分均浆1-2min。
然后，在12000r/min下离心五分钟，弃沉淀，按每毫升Trizol加入200微升的氯仿，盖紧离心管，用手振荡混匀15s，室温放置十分钟。
然后，在四摄氏度12000g离心十五分钟，吸取上层水相，移至另一新的离心管中，按每毫升Trizol加入0.6ml异戊醇，混匀放置室温5-10min。
然后，在四摄氏度12000g离心十分钟，弃上清液，按每毫升Trizol加入1ml的75%乙醇，温和振荡，悬浮沉淀。
然后，在室温晾干或真空干燥5-10min，再测260nm下吸光值定量RNA浓度。
最后，RNA可进行mRNA分离，或储存于70%乙醇中并保存于-70摄氏度下，加氯仿前的均浆液可以保存一个月以上。
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